菊物研究 中国民族民fro-!医药 The Medicine Study Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy ・32・ 浅谈E L I SA的影响因素 张玉霞周杰钊 河南省上蔡县人民医院,河南上蔡463800 【摘要】ELISA0 ̄酶联免疫吸附试验,ELISA是一种敏感性高、重复性好的固相酶联免疫测定广泛用于各种抗原抗体的检测,但影响 因素较多,有时易出现假阳性或假阴性,本文重点针对内源性、外源性因素对ELISA ̄U定结果的影响进行探讨。 【关键词】酶联免疫吸附试验(ELISA);测定结果;影响因素 【中图分类号】R392.33 【文献标识码】A 【文章编号】1007—8517(2010)18—032一I 如今病毒性疾病的诊断主要依赖对其抗原、抗体的检 2.6试剂在室温下平衡<30分钟,配洗液的水不符合要求。 测。而检测方法大多采用酶联免疫吸附试验(ELISA),如 2.7加样速度过快,加样时加在孔壁上或产生气泡。 何保证实验结果的准确性,现结合自己的实际工作经验,总 2.8温育时关键因素之一,尽量选择温度低的,温育时间 结了下列影响因素,希望对检验工作者有所帮助。 长的试剂盒。 1 内源性干扰因素 2.9洗涤要彻底。 1.1类风湿因子(RF) 在类风湿患者、其他自身免疫性 2.10双波长比包可减少容器上的划痕和指印等造成的光干扰。 疾病及正常人的血清中,常含有较高或不同浓度的RF,RF一 2.11试剂质量的影响。选用高质量的试剂是保证结果准确 般为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心 的关键因素之一。 法检测的血清标本中如含有RF,它可以充当抗原成份,同时 3高值钩状效应(HOOK效应) 与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。 在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时出现 1.2补体补体易激活Clq起到铰链作用,结果易出现假阳 钩状效应。过量抗原分别和固相抗体和酶标抗体结合,而不 性。 再形成“夹心复合物”类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现 1.3嗜异性抗体人类血清中含有天然的嗜异性抗体,将 象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准 ELISA系统中一抗和二抗连接起来,造成假阳性。 曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如 1.4 自身抗体 由于B细胞的超反应性,患者血清中常出现 按常规法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称 一些自身抗体,能与靶抗原结合形成复合物。 为钩状效应,因为标准曲线到达高峰后钩状弯落。 1.5溶菌酶可致假阳性。 综上所述,ELISA影响因素较多,要想提高检验质量, 2外源性干扰因素 就要加强实验室科学管理,加强标准化程序操作,加强质量 2.1标本溶血,分离不完全、加有血球。 控制,提高人员素质,以减少假阳性、假阴性的发生 2.2标本被细菌污染。 参考文献 2.3标本储存时间过长。 [1]宋炳荣,杜彩霞,等.ELISA一步法检测乙型肝炎病毒标志物影响因素的 实验研究[J].实用医技杂志,2004,9(i1):65. 2.4标本凝固不全。 [2]刘国剐,钟海明,胡金元.ELISA检测HIv抗体的几点体会[J].中华医学 2.5冰冻保存标本反复冻融。 实践杂志,2004,3(10):907. 作者简介:张玉霞(1969一),中级职称,现供职于河南省上蔡县人民医院检验科细菌室。 (上接第27页) 胃丸与香砂养胃片,功效相同但价格却相差很大,这样势必 血府逐淤连续2年稳居榜首,主要功能是活血祛淤、行 会加重患者的经济负担。因此一方面要加大进货监管力度, 气止痛、瘀血内阻、头痛胸痛、内热憋闷、失眠多梦、心悸 另一方面医生应以药物经济学角度出发,选择疗效确切价格 征肿、急躁善怒,所以它的使用率除了儿科外几乎覆盖到全 低廉的药品,才能符合高效经济的合理用药原则。 院所有科室。由于西药的作用欠佳,脑心通和血塞通也因 这里还要特别提出许多医务人员普遍存在认为中药注射 其疗效确切、安全可靠在治疗心血管疾病尤其是恢复期得到 剂比西药安全的现象,因此常常出现剂量大、浓度高、疗效 了广大医生和患者的青睐。平消胶囊作用是活血祛瘀、止痛 长等不合理现象。其实中成药特别是中药注射剂的不良反应 散结、清热解毒、扶正祛邪,坤复康胶囊活血化瘀、清利湿 已屡见报道,其主要问题是化学成分复杂、制备工艺有待完 热,丹黄祛瘀主要功能是止痛、软坚散结;一方面原因我院 善,质量标准不够合理,临床疗效缺乏观察等,因此有学者 乳腺科是全国乳腺示范专科,妇科也是我院品牌专科;另一 们提出要加强中药的不良反应的监测和上市后的再评价 。 方面随着社会发展,人民生活水平的提高,妇女的自我保健 作者认为应采取一系列措施,例如积极宣传合理用药知识,改 意识也不断提高,同时社会压力大、竞争激烈、生活不规律 变中医无毒或少毒的偏见,清除“中药没有不良反应”“是天 也导致了乳腺病与妇科疾病的增多。 然药物,没有毒副作用”等误解。临床医生应综合分析疾病 3讨论 的证侯属性和药物属性,辩证施治,对症下药。加强对临床 由表2表3可以发现前1O位中成药的种类几乎没发生什么 药师的培训与重视,真正发挥临床药师对临床用药的监督指 变化,说明我院临床用药较稳定,没有求贵求新,而且我院 导作用,减少重复用药、超剂量用药、配伍不当,浓度高等 中成药应用基本合理,疗效确切,剂型先进的中成药在临床 不合理现象,才能更好的做到安全、有效、经济、合理的使 应用中占有优势。但是由于品种集中、金额较大,提醒我们 用中成药。 必须加大进货的监管力度。 参考文献 销售金额占主要地位的大部分中成药都是“医保”范围 [1】金香花,王辉明,孙向红,等。2002—2004我院中药注射剂应用状况及趋 势分析[J].中国药房,2006. 内使用的药品,说明我院在使用药品上市严格按照“医保” [2】张冰,李莉.日临红参麦注射液的l临床应用进展[J].现代中鹾医结合杂 规定的,但是从处方分析中发现,我院在使用中成药时仍然 志,2007. ‘ 存在不合理用药,例如:大黄麻虫丸与大黄麻虫片,香砂养 [3]陈如泉.中药的不良反应与上市后再评价[J].湖北中医学院学报,2003.